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miRNA 3' UTR靶標表達克隆

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廠商性質: 工程商 產品時間: 2020-12-31
美國GeneCopoeia(復能基因)提供基于*基因組miRNA作用的靶標表達克隆,涵蓋了公共數據庫。miRNA靶標表達克隆包含SV40啟動子驅動的報告基因(螢火蟲熒光素酶)的下游緊接3’-UTR(即miRNA作用位點)序列。 第二個報告基因renilla luciferase,可用于監(jiān)測轉染,表達效率,并可以作內參。
 人類基因組miRNA靶標表達克隆的特點

 

通過螢火蟲熒光素酶的活性分析,可獲得miRNA對潛在靶標基因調控作用的結果。表達克隆轉錄后形成螢火蟲熒光素酶ORF與3’UTR的嵌合體mRNA,如果有特異的miRNA可與3’-UTR某段序列互補結合,嵌合體中熒光素酶ORF所編碼蛋白的活性也相應受到調控, 因此通過檢測熒光素酶的發(fā)光強度就可以定量地測定miRNA對應靶標的mRNA調控的效果。

miRNA 前體和靶標表達克隆的應用

  • 基因表達調控:通過轉染或病毒顆粒感染的方式將單個或整套的miRNA導入培養(yǎng)細胞,進行單個miRNA或多個miRNA對基因的表達調控。對miRNA的調控效應和功能進行特定條件或體統(tǒng)化的研究
  • miRNA靶標基因的確認和鑒定:利用miRNA靶標驗證表達克隆,進行大規(guī)模的miRNA作用靶標基因的篩選和確證。一個miRNA可作用的所有靶標的基因,和可作用于一個mRNA的3’-UTR所有miRNA

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